所在位置: 首页> 技术文章> 根目录> 细胞>

细胞转染一般操作步骤

日期:2025-05-02 03:41
浏览次数:232
摘要: 转染,是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入,转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。细胞转染是指将外源分子如DNA,RNA等导入真核细胞的技术。应用在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中。 细胞转染实验一般过程步骤: 1. 转染试剂的准备 ① 将400ul去核酸酶水加入管中,震荡10秒钟,溶解脂状物。 ② 震荡后将试剂放在-20摄氏度保存,使用前还需震荡。 2. 选择合...

 转染,是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入,转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。细胞转染是指将外源分子如DNA,RNA等导入真核细胞的技术。应用在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中。


细胞转染实验一般过程步骤:


1. 转染试剂的准备


① 将400ul去核酸酶水加入管中,震荡10秒钟,溶解脂状物。


② 震荡后将试剂放在-20摄氏度保存,使用前还需震荡。


2. 选择合适的混合比例(1:1-1:2/脂质体 体积:DNA质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA,震荡后在加入合适体积的转染试剂,再次震荡。


3. 将混合液在室温放置10―15分钟。


4. 吸去培养板中的培养基,用PBS或者无血清培养基清洗一次。


5. 加入混合液,将细胞放回培养箱中培养一个小时。


6. 到时后,根据细胞种类决定是否移除混合液,之后加入*培养基继续培养24-48小时。