影响PCR特异性的因素供参考

日期:2025-05-01 02:12
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摘要: 影响pcr特异性的因素如下: 许多因素可以影响pcr的特异性,在此归纳,供大家参考: ①退火步骤的严格性:提高退火温度可以减少不匹配的杂交,从而提高特异性。 ②减短退火时间及延伸时间可以减少错误引发及错误延伸。 ③引物二聚体是zui常见的副产品,降低引物及酶的浓度也可以减少错误引发,尤其是引物的二聚化。 ④改变mgcl2(有时kcl)浓度可以改进特异性,这可能是提高反应严格性或者对taq酶的直接作用。 一般认为PCR产物应在48h以内完成电泳检测,有些zui好于当日电泳检测,大于48...

影响pcr特异性的因素如下:

许多因素可以影响pcr的特异性,在此归纳,供大家参考:

①退火步骤的严格性:提高退火温度可以减少不匹配的杂交,从而提高特异性。

②减短退火时间及延伸时间可以减少错误引发及错误延伸。

③引物二聚体是zui常见的副产品,降低引物及酶的浓度也可以减少错误引发,尤其是引物的二聚化。

④改变mgcl2(有时kcl)浓度可以改进特异性,这可能是提高反应严格性或者对taq酶的直接作用。

一般认为PCR产物应在48h以内完成电泳检测,有些zui好于当日电泳检测,大于48h后带型就会出现不规则,甚至消失。