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PCR电泳出现拖尾现象探究
日期：2025-06-16 08:03
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摘要：PCR电泳出现拖尾现象,就是弥散。其原因,主要从以下两个方面考虑：
1、PCR产物自身原因：
往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多。
对策：①减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶.②减少dNTP的浓度.③适当降低Mg2+浓度.④增加模板量,减少引物的用量 ,减少循环次数,提高退火温度。
2、电泳体系的问题：
（1）电泳缓冲液TAE或者TBE的污染,建议更换缓冲液.（2）上样时样品漂了,建议增加上样缓冲液的用量,以及小心加样.（3）电压太高.（4）适当把你的胶的浓度加大...
PCR电泳出现拖尾现象,就是弥散。其原因,主要从以下两个方面考虑：
1、PCR产物自身原因：
往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多。
对策：①减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶.②减少dNTP的浓度.③适当降低Mg2+浓度.④增加模板量,减少引物的用量 ,减少循环次数,提高退火温度。
2、电泳体系的问题：
（1）电泳缓冲液TAE或者TBE的污染,建议更换缓冲液.（2）上样时样品漂了,建议增加上样缓冲液的用量,以及小心加样.（3）电压太高.（4）适当把你的胶的浓度加大.（根据你的片断大小而定）（5）观察你的marker是否也存在拖尾现象,作为对照。
1、PCR产物自身原因：
往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多。
对策：①减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶.②减少dNTP的浓度.③适当降低Mg2+浓度.④增加模板量,减少引物的用量 ,减少循环次数,提高退火温度。
2、电泳体系的问题：
（1）电泳缓冲液TAE或者TBE的污染,建议更换缓冲液.（2）上样时样品漂了,建议增加上样缓冲液的用量,以及小心加样.（3）电压太高.（4）适当把你的胶的浓度加大.（根据你的片断大小而定）（5）观察你的marker是否也存在拖尾现象,作为对照。