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WB结果中杂带较多可能的原因及建议
日期：2025-06-16 03:45
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摘要：
WB结果中杂带较多可能的原因及建议：
①目的蛋白存在多个修饰位点(磷酸化位点、糖基化位点等等)，本身可以出现多条带。查文献或生物信息学分析，获得蛋白序列的修饰位点信息，去除修蛋白饰后确定蛋白实际大小，这个需要一定的生物化学基础和生信分析能力。
②目的蛋白有其它剪切本，查阅文献或生物信息学分析其可能性。
③样本处理过程中目的蛋白发生降解，加入蛋白酶抑制剂；样本处理在冰上操作。
④上样量过高，过于敏感，适当减少上样量。
⑤一抗特异性不高，重新选择或制备高特异性的抗体。
⑥一抗不纯，纯化抗体。
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WB结果中杂带较多可能的原因及建议：
①目的蛋白存在多个修饰位点(磷酸化位点、糖基化位点等等)，本身可以出现多条带。查文献或生物信息学分析，获得蛋白序列的修饰位点信息，去除修蛋白饰后确定蛋白实际大小，这个需要一定的生物化学基础和生信分析能力。
②目的蛋白有其它剪切本，查阅文献或生物信息学分析其可能性。
③样本处理过程中目的蛋白发生降解，加入蛋白酶抑制剂；样本处理在冰上操作。
④上样量过高，过于敏感，适当减少上样量。
⑤一抗特异性不高，重新选择或制备高特异性的抗体。
⑥一抗不纯，纯化抗体。
⑦一抗或者二抗浓度偏高，适当降低抗体浓度。